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      單克隆抗體篩選與制備(NGS方法)

      1
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      高通量DNA測序技術(shù)為分析抗體基因序列, 特別是針對大容量、多樣性高的抗體基因庫序列的系統(tǒng)分析提供了可能。


      對測序得到的原始數(shù)據(jù)(Raw reads)進行質(zhì)量控制,濾掉質(zhì)量低與長度短的讀段并獲得干凈的數(shù)據(jù)(Clean reads);利用IgBlast和 IMGT對抗體的可變區(qū)進行V(D)J生殖系基因定位(VDJ annotation);根據(jù)生殖系基因定位將每個合并的讀段剪切至恰好包含整個可變區(qū)域;去除冗余數(shù)據(jù),對于每個唯一讀段(Unique reads)記錄其總數(shù)量;系統(tǒng)化注釋獲得 reads 的可變區(qū)域并提取CDR3區(qū)域;分析CDR3區(qū)域并獲得抗體的家系信息(Clone or lineage);獲得每個家系中輕重鏈可變區(qū)域的序列特性,并利用重鏈和輕鏈各家系的reads數(shù)量進行輕重鏈配對;對配對好的抗體序列通過實驗驗證功能。

      服務(wù)優(yōu)勢:
      1.采用RACE技術(shù)和專門優(yōu)化的PCR擴增體系與程序,真實體現(xiàn)免疫系統(tǒng)發(fā)育過程
      2.多樣化的NGS分析平臺
      3.成功率高與快速交付速度
      4.完備的生物信息學(xué)分析,深度挖掘高價值信息

      應(yīng)用方向:
      1.開發(fā)高親和力抗體
      2.縮短單克隆抗體開發(fā)周期

      服務(wù)內(nèi)容:


      客戶提供:
      免疫原相關(guān)信息

      交付內(nèi)容:
      1. NGS測序數(shù)據(jù)
      2. 生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果
      3. 重組抗體的序列信息與構(gòu)建
      4. 重組抗體的驗證結(jié)果
      4. 實驗周期3-5個月
      Genenode|君諾德公司

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