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2×Taq PCR Master Mix(不含染料)
2×Taq PCR Master Mix(不含染料),本產(chǎn)品是由Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、PCR Buffer以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑組成的濃度為2×的預(yù)混體系。具有操作簡(jiǎn)單快捷,靈敏度高,特異性強(qiáng),穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),并可最大限度地減少人為誤差和污染。
產(chǎn)品編號(hào):P4104
產(chǎn)品規(guī)格:5ml
產(chǎn)品價(jià)格:270
包裝:支
儲(chǔ)存條件:F
2×Taq PCR Master Mix(不含染料)
包裝規(guī)格:
| 編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 目錄價(jià) |
| P4104-5 | 2×Taq PCR MasterMix(不含染料,無(wú)色) | 5*1mL | 150 |
| P4104-10 | 2×Taq PCR MasterMix(不含染料,無(wú)色) | 10*1mL | 290 |
| P4104-100 | 2×Taq PCR MasterMix(不含染料,無(wú)色) | 100mL | 2500 |
| P4104-500 | 2×Taq PCR MasterMix(不含染料,無(wú)色) | 500mL | 10000 |
一、產(chǎn)品介紹:
本產(chǎn)品是由Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、PCR Buffer以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑組成的濃度為2×的預(yù)混體系。具有操作簡(jiǎn)單快捷,靈敏度高,特異性強(qiáng),穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),并可最大限度地減少人為誤差和污染。
本產(chǎn)品使用方便快捷,能避免 PCR 操作過(guò)程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。
2×Taq PCR MasterMix(含染料):已加入紅色染料,反應(yīng)結(jié)束后可直接進(jìn)行電泳檢測(cè),無(wú)需再使用上樣緩沖液。
2×Taq PCR MasterMix(不含染料):沒(méi)有添加任何示蹤染料,電泳時(shí)需要加含有示蹤染料的上樣緩沖液。
擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物3′端自動(dòng)加“A”堿基,因此可直接用于T/A克隆。主要適用于PCR法擴(kuò)增DNA、DNA序列測(cè)定等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品主要成分:Taq DNA Polymerase (recombinant):0.1units/μl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM
二、存儲(chǔ)及濃度:-20 ℃ 保存。濃度: 0.1U/μl
三、產(chǎn)品特點(diǎn):
獨(dú)創(chuàng)的MasterMix配方使擴(kuò)增產(chǎn)物得率高,重復(fù)性強(qiáng),穩(wěn)定性好,操作更加簡(jiǎn)單快捷,靈敏度高,特異性強(qiáng),穩(wěn)定性好。
四、質(zhì)量控制:
經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性,PCR方法檢測(cè)無(wú)宿主殘留DNA,能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因,室溫放置一周,無(wú)明顯活性改變;
五、使用方法:
以下舉例僅供參考,實(shí)際反應(yīng)條件因模板,引物等的結(jié)構(gòu)不同而異,需根據(jù)實(shí)際情況,設(shè)置最佳反應(yīng)條件。
1.用2xTaq PCR Mastermix,以人基因組DNA為模板,擴(kuò)增1kb片段,反應(yīng)體系25ul(如反應(yīng)體系不同,可按此比例增加和減少用量);
2.PCR反應(yīng)體系:
| 試劑 |
25ul反應(yīng)體系 |
50ul反應(yīng)體系 |
|
2xTaq PCR MasterMix |
12.5ul |
25ul |
|
Forward Primer |
0.1-1ul |
2ul |
|
Reverse Primer |
0.1-1ul |
2ul |
|
Template DNA |
10pg-1ug |
﹤1ug |
|
RNase-free water(ddH2O) |
Up to 25ul |
Up to 50ul |
Note:引物濃度請(qǐng)以終濃度0.1-1.0uM作為設(shè)定范圍的參考,擴(kuò)增效率不高的情況下,可提高引物的濃度,發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí),可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
3.PCR反應(yīng)條件:
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 3min | 1 |
| 變性 |
94℃ |
30s |
30cycles |
| 退火 |
55-65℃ |
30s | |
| 延伸 |
72℃ |
1-2kb/min | |
| 終延伸 |
72℃ |
5min |
1 |
4.結(jié)果檢測(cè):本產(chǎn)品已添加染料(紅色),反應(yīng)結(jié)束,取5ul反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。


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