培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要精準(zhǔn)細(xì)胞計(jì)數(shù),在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞,總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力,用臺(tái)盼蘭染細(xì)胞,死細(xì)胞著色,活細(xì)胞不著色,從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。所以在細(xì)胞生物學(xué)研究過程中,細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活率測定是非常重要的工作,血球計(jì)數(shù)板消耗了研究者大量時(shí)間與體力,且結(jié)果也不能得到保證,重復(fù)性差。
而全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀擺脫了手工計(jì)數(shù)細(xì)胞的苦差和煩惱,同時(shí)結(jié)果更加準(zhǔn)確客觀,操作快速簡便,重復(fù)性好,尤其為我們科研工作者節(jié)省了寶貴的時(shí)間,使研究者把更多的精力放在更重要的工作上。
目前,市面上也出現(xiàn)了多種品牌自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,有基于細(xì)胞圖像的,也有基于庫爾特coulter原理的,但是主要目的就是將人工從繁冗無聊的手工計(jì)數(shù)中解放出來,排除操作者的主觀性。
01—— 血球計(jì)數(shù)板派(你數(shù)派) ——
血球計(jì)數(shù)板派(你數(shù)派)一直秉承著“只要眼睛好,世界很美好”的宗旨,通?!澳銛?shù)派”師兄妹都是火眼金睛視力好,心無旁騖定力強(qiáng),心算筆算能力強(qiáng),實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞計(jì)數(shù)活少,人力成本低,時(shí)間不值錢。血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)很容易受主觀影響,結(jié)果不準(zhǔn)確,重復(fù)性也不好,每次計(jì)數(shù)結(jié)果都不一樣,不同師兄妹計(jì)數(shù)結(jié)果也不一樣!若是哪天有幾十個(gè)細(xì)胞樣本要計(jì)數(shù),那真是要讓人發(fā)瘋了!
02—— 圖像計(jì)數(shù)派 ——
此派顧名思義,是一個(gè)想依靠基于經(jīng)典的臺(tái)盼藍(lán)染色法,整合光學(xué)成像技術(shù)和智能圖像識(shí)別技術(shù)來估算細(xì)胞數(shù)量的門派。
想法很不錯(cuò),理想很豐滿,現(xiàn)實(shí)很骨感。
通過單個(gè)焦點(diǎn)平面來精確計(jì)數(shù)和評(píng)估細(xì)胞活力,這樣得到的結(jié)論可能不太準(zhǔn)確,自動(dòng)對(duì)焦技術(shù)再厲害,10ul液滴里面的細(xì)胞數(shù)量達(dá)百萬級(jí),30秒內(nèi)自動(dòng)對(duì)焦技術(shù)和圖像分析算法真的可以提供準(zhǔn)確且重復(fù)性高的細(xì)胞總數(shù)和活細(xì)胞數(shù)目嗎?也就只能呵呵了!
圖像計(jì)數(shù)容易出現(xiàn)的問題:
目前市面上的圖像計(jì)數(shù)儀器可謂是琳瑯滿目,計(jì)數(shù)最佳濃度5x10
5左右,濃度太低或太高都無法準(zhǔn)確計(jì)數(shù),一般培養(yǎng)的細(xì)胞均需要稀釋后檢測,還有顆粒粒徑小于10μm均無法準(zhǔn)確對(duì)焦計(jì)數(shù),如干細(xì)胞、從血液、組織等獲得的各種原代細(xì)胞如淋巴細(xì)胞、外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),小鼠脾臟單細(xì)胞懸液,畢赤酵母細(xì)胞都無法計(jì)數(shù),活動(dòng)的精子也無法計(jì)數(shù),但流式庫爾特coulter技術(shù)可以輕松準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。
圖像計(jì)數(shù)派每次細(xì)胞計(jì)數(shù)均需要計(jì)數(shù)芯片一張,不同芯片耗材價(jià)格不一樣,10-20元/張不等,一年下來芯片耗材成本1-3萬不等,細(xì)胞計(jì)數(shù)量大的實(shí)驗(yàn)室總會(huì)購買2-5臺(tái),這樣計(jì)數(shù)芯片消耗量越大,成本越高,所以在使用圖像計(jì)數(shù)儀的實(shí)驗(yàn)室都是土豪,真土豪!
03—— 流式庫爾特計(jì)數(shù)派 ——
好了,該我們登場了,數(shù)千古風(fēng)流人物,還看今朝!流式庫爾特圖像計(jì)數(shù)儀FIL,有優(yōu)勢無劣勢,有特點(diǎn)無缺點(diǎn),下面我們開始正題:
1947年庫爾特先生發(fā)明了以電阻變化法測量顆粒和細(xì)胞粒度及數(shù)目的庫爾特原理(Coulter Principle)。著名的庫爾特原理:懸浮在電解液中的顆粒隨電解液通過小孔管時(shí),取代相同體積的電解液,在恒電流設(shè)計(jì)的電路中導(dǎo)致小孔管內(nèi)外兩電極間電阻發(fā)生瞬時(shí)變化,產(chǎn)生電位脈沖,脈沖信號(hào)的大小和次數(shù)與顆粒的大小和數(shù)目成正比。

庫爾特原理被行業(yè)稱作細(xì)胞計(jì)數(shù)金標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù),專為細(xì)胞應(yīng)用而設(shè)計(jì),其將細(xì)胞計(jì)數(shù)與細(xì)胞直徑大小測量功能合二為一,可用于細(xì)胞、顆粒計(jì)數(shù)及粒度分析。
JIMBIO CL/FIL流式庫爾特計(jì)數(shù)儀,免除任何芯片耗材,極大降低實(shí)驗(yàn)成本。本機(jī)利用細(xì)胞計(jì)數(shù)金標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)—庫爾特原理,流式方法聚焦提高精確性,可選配實(shí)現(xiàn)0.5~200μm粒徑范圍內(nèi)的細(xì)胞計(jì)數(shù),為您實(shí)現(xiàn)更低成本、更為精確的細(xì)胞及各類生物顆粒綜合計(jì)數(shù)。
Jimbio CL采用流式庫爾特原理,庫爾特粒徑分辨率0.5μm,阻抗技術(shù)更精確;
Jimbio FIL結(jié)合了流式庫爾特原理和圖像法,庫爾特0.5μm高粒徑分辨率結(jié)合圖像染色法,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)計(jì)數(shù)與細(xì)胞活率判斷。
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預(yù)約試機(jī),免費(fèi)細(xì)胞檢測服務(wù)活動(dòng)開始了!僅限華北地區(qū)提供此項(xiàng)免費(fèi)細(xì)胞檢測服務(wù)。
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只需我們預(yù)約好時(shí)間,您準(zhǔn)備好細(xì)胞,我?guī)铣岬牧魇綆鞝柼丶?xì)胞計(jì)數(shù)儀,您有多少細(xì)胞我都可以輕松解決!
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直方圖直觀反映細(xì)胞狀態(tài),直徑選區(qū)功能,分析精準(zhǔn)!
0.5-30μm檢測范圍,1x104-1x107檢測濃度,功能強(qiáng)大!
庫爾特精準(zhǔn)計(jì)數(shù)測粒徑+圖像法判死活及團(tuán)聚率,十分完美!
產(chǎn)品優(yōu)勢:
1、低成本:無需任何一次性芯片耗材,極大降低檢測成本;
2、庫爾特粒徑分辨率0.5μm,阻抗加圖像檢測,精確判斷總數(shù)及活性;
3、5-200μm粒徑范圍內(nèi)檢測通道,針對(duì)不同檢測需求,靈活配置不同規(guī)格芯片及相關(guān)分析軟件;
4、操作簡單:無需稀釋,一步加樣,快速檢測,自動(dòng)清洗;
5、軟件多指標(biāo)輸出:庫爾特檢測→細(xì)胞濃度/直徑/體積,按照粒徑分區(qū)顯示選區(qū)濃度/平均直徑/平均體積;
6、多功能:圖像檢測→死/活比率、死/活濃度、細(xì)胞生長曲線、稀釋計(jì)算、細(xì)胞聚團(tuán)率,平均圓度,細(xì)胞形態(tài),檢測數(shù)據(jù)可由USB接口導(dǎo)出;
7、應(yīng)用案例:動(dòng)物細(xì)胞、外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),小鼠脾臟單細(xì)胞懸液,畢赤酵母細(xì)胞、
干細(xì)胞、原代細(xì)胞、原生質(zhì)體,精子、單細(xì)胞藻類、真菌孢子、花粉、巨噬細(xì)胞等的計(jì)數(shù)及相關(guān)分析;
特別是針對(duì)4-10μm范圍小粒徑的PBMC細(xì)胞,小鼠脾細(xì)胞懸液,畢赤酵母細(xì)胞,精子等等,傳統(tǒng)圖像計(jì)數(shù)儀采用相機(jī)對(duì)焦拍照方法根本無法計(jì)數(shù),而我們的流式庫爾特計(jì)數(shù)儀,所有細(xì)胞通過微流控芯片逐個(gè)計(jì)數(shù),可以精準(zhǔn)細(xì)胞計(jì)數(shù)。
精子懸液計(jì)數(shù)
細(xì)胞計(jì)數(shù)步驟:
1.計(jì)數(shù)初始化

2.提示開蓋加樣檢測

3.打開蓋子,加10ul待檢測樣品

4.細(xì)胞計(jì)數(shù)中

5.系統(tǒng)自動(dòng)沖洗

6.直方圖直觀反映細(xì)胞狀態(tài)

7.細(xì)胞檢測結(jié)果

8.圖像檢測結(jié)果
案例應(yīng)用:
◆細(xì)胞培養(yǎng)計(jì)數(shù)
庫爾特粒徑分辨率0.5μm,通過細(xì)胞大小分布情況判定轉(zhuǎn)染前細(xì)胞狀態(tài),并能通過圖像檢測模塊進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色活性判斷,歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)和導(dǎo)出能夠跟蹤細(xì)胞生長情況。
◆真菌孢子計(jì)數(shù)
能夠快速統(tǒng)計(jì)通過紗布過濾的真菌孢子懸液的濃度,可以對(duì)真菌的產(chǎn)孢率進(jìn)行精確統(tǒng)計(jì),同時(shí)避免細(xì)胞計(jì)數(shù)板帶來的偶然誤差和系統(tǒng)誤差。
◆單細(xì)胞藻類計(jì)數(shù)
快速檢測培養(yǎng)液中藻類的濃度,避免通過吸光度的方式找尋藻類的初始實(shí)驗(yàn)濃度,快速進(jìn)入藻類的下一步實(shí)驗(yàn)檢測。
◆酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)和形態(tài)觀察
快速統(tǒng)計(jì)酵母菌的數(shù)量和濃度,并對(duì)酵母菌的出芽生殖情況進(jìn)行拍照和算法分析,為酵母生長情況判定提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
◆花粉計(jì)數(shù)
在對(duì)花粉進(jìn)行快速計(jì)數(shù)的同時(shí),通過圖像算法的分析,統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)率,為后期花粉授粉提供了很好的參考。
◆精子計(jì)數(shù)
體外受精前,對(duì)精子進(jìn)行計(jì)數(shù),能夠讓精子以一定的濃度比例與卵子相混合,提高受精的成功率。
◆細(xì)菌快速檢測
配置0.5μm的芯片,能夠?qū)?xì)菌進(jìn)行快速的定量檢測,相較于涂布培養(yǎng)法極大縮短了實(shí)驗(yàn)周期,并克服了比濁法的半定量缺陷。
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