技術服務

AFLP是基于PCR技術擴增基因組DNA限制性片段，基因組DNA先用限制性內切酶切割，然后將雙鏈接頭連接到DNA片段的末端，接頭序列和相鄰的限制性位點序列，作為引物結合位點。限制性片段用二種酶切割產生，一種是罕見切割酶，一種是常用切割酶。它結合了RFLP和PCR技術特點，具有RFLP技術的可靠性和PCR技術的高效性。由于AFLP擴增可使某一品種出現(xiàn)特定的DNA譜帶，而在另一品種中可能無此譜帶產生，因此，這種通過引物誘導及DNA擴增后得到的DNA多態(tài)性可做為一種分子標記。

服務內容：
1. 提供AFLP產物上機檢測
   客戶提供選擇性擴增好的產物，我們提供毛細管電泳檢測，以及進行Size和峰高等分析；

2. AFLP引物篩選
   客戶提供DNA，我們篩選出有多態(tài)性的AFLP引物，供后續(xù)檢測使用；

3. AFLP全套檢測服務
   提供從DNA的提取，引物篩選到樣本的批量分析全套服務。

技術路線：

AFLP反應程序主要包括模板DNA制備，酶切片段擴增及凝膠電泳分析這3個基本步驟。

具體步驟如下：

1. 首先要制備高分子量(HMW)基因組DNA，選擇6個堿基識別位點的限制性內切酶(通常是EcoRI或PstI或SacI)。 
2. 酶切后的限制性片段在T4連接酶的作用下與特定的接頭相連接，形成帶有接頭的特異性片段。
3. DNA片段的預擴增。
4. 在Taq聚合酶的作用下，完成AFLP的選擇性擴增。
5. 帶熒光標記的PCR產物進行測序儀上機檢測。
6. 多態(tài)性比較分析。

送樣要求：
細胞（≥106）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、基因組DNA（體積≥20μl，濃度≥ 50 ng/μl）

提供結果：
原始數(shù)據、引物序列、實驗報告、PDF格式毛細管電泳圖譜和EXCEL格式片段長度。