技術(shù)服務(wù)

技術(shù)原理：主要應(yīng)用連接酶檢測反應(yīng) (ligase detection reaction，LDR)技術(shù)。即在Taq DNA連接酶的作用下, 當(dāng)左右兩條寡核苷酸探針與目的DNA序列完全互補，并且兩條探針之間沒有空隙時才能發(fā)生連接反應(yīng)，否則連接反應(yīng)不能進行，最后通過熒光掃描片段長度，根據(jù)測序峰移動的膠位置，通過末端未標(biāo)記探針的3個堿基差異，確定同一位點的不同基因型，再通過末端未標(biāo)記探針的7個堿基差異，確定不同位點，最終實現(xiàn)對SNP 位點的精確檢測。

原理及流程示意圖：


PCR-LDR技術(shù)流程：
1. 多重PCR擴增：獲得目標(biāo)位點所在的片斷；
2. 多重LDR：得到長度各異的檢測產(chǎn)物；
3. 3730測序儀檢測：根據(jù)測序電泳得到不同的峰值；
4. 判斷SNPs結(jié)果，數(shù)據(jù)分析；

方法特點：
1. 通用性強：適用任何多態(tài)性位點和各種SNP位點的分型，不需要人工引入酶切位點； 
2. 分型準(zhǔn)確，檢出率高：其準(zhǔn)確度可達99.2%以上。
3. 檢測快速：LDR技術(shù)的最大優(yōu)點就是實驗時間短！與Taqman、RFLP、SSCP和DHPLC相比，由于檢測條件更易控制，從DNA樣本到數(shù)據(jù)的產(chǎn)出，整體實驗只需要幾周。

適宜范圍：適宜 100-1000個樣品，1-5個位點；

訂單點擊下載：SNP基因分型訂單表

客戶需要提供：
1. 細胞，組織或血液等樣品材料，基因組DNA提取費用單獨收費；
2. 基因組DNA（體積≥30μl，濃度≥50 ng/μl），純度 OD260/280 為1.7～1.9之間；
3. 人類基因組需提供SNP位點的RS號。其它物種如牛、雞、魚等無rs號的，需提供SNP位點上下游各200bp的確切序列，SNP位點的突變類型，以及位點的上下游25bp內(nèi)是否存在其它連鎖位點。

最終提交結(jié)果：
1. SNPs結(jié)果（ExceL表格）；
2. 完整實驗報告：擴增和反應(yīng)體系、所涉及的引物、探針序列；

想咨詢了解更多關(guān)于PCR-LDR連接酶檢測SNP分型技術(shù)和收費，請電話或郵件聯(lián)系我們！ [email protected]， 18518676727