產(chǎn)品中心

糞便基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

Stool DNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

一.產(chǎn)品介紹：
     常規(guī)的DNA純化方式并不能有效地去除糞便中存在的大量抑制因子而導(dǎo)致下游實(shí)驗(yàn)的失敗，如PCR不能擴(kuò)增出所需片段。該試劑盒采用DNA吸附柱和新型獨(dú)特的溶液系統(tǒng)，能有效去除動(dòng)物糞便中各種影響下游實(shí)驗(yàn)（如PCR）的抑制因子，并能高效地回收糞便中的基因組DNA。動(dòng)物糞便樣品經(jīng)特殊緩沖液ASL重懸后，70℃處理5分鐘裂解細(xì)菌；離心去除不溶解的雜質(zhì)，蛋白酶K消化進(jìn)一步去除蛋白和雜質(zhì)；然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟， 抑制物去除液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除， 最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

二.產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3.快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在40分鐘內(nèi)完成。
4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。

三.適用范圍：
    適用于快速提取各種糞便DNA。

四.儲(chǔ)存條件：
1.緩沖液ASL或者結(jié)合液CB低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在70℃水浴幾分鐘幫助重新充分溶解，恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2.為避免降低活性，方便運(yùn)輸，提供蛋白酶K為凍干粉狀，收到后，可短暫離心后，加入1毫升滅菌水溶解，因?yàn)榉磸?fù)凍融可能會(huì)降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分裝凍存，－20℃保存。
3.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化，各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。

五.注意事項(xiàng)：
1.所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2.開始實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱到70℃?zhèn)溆谩?br /> 3.結(jié)合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4.洗脫液EB不含有螯合劑EDTA， 不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫， 但應(yīng)該確保pH大于7.5， pH過低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在－20℃。DNA如果需要長(zhǎng)期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。
5.PCR可能被過量的DNA（一般大于1μg）抑制，使用最小用量的洗脫DNA（適當(dāng)稀釋）反而可以得到更好的擴(kuò)增。一般加入的洗脫DNA體積不要超過總PCR反應(yīng)體積的10％。我們建議在PCR反應(yīng)體系中加入終濃度0.1 μg/μl的BSA（牛血清白蛋白）有助于得到最佳擴(kuò)增效果。