產(chǎn)品中心

CRISPR/Cas系統(tǒng)核酸檢測(cè)試紙條

CRISPR/Cas system Nucleic Acid Test Strips

【工作原理】

本產(chǎn)品采用層析式雙抗體夾心法快速檢測(cè)核酸擴(kuò)增CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切產(chǎn)物。用戶(hù)僅需在探針設(shè)計(jì)時(shí)將一端標(biāo)記生物素（Biotin），另一端標(biāo)記異硫氰酸熒光素（FITC）或 6-羧基熒光素（6-FAM）。

測(cè)試時(shí)，將試紙條插入待檢樣本。樣本中含有的帶有標(biāo)記物的核酸探針首先與膠乳標(biāo)記的抗核酸標(biāo)記物抗體結(jié)合，隨后結(jié)合物在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析，樣本中未被酶切的核酸探針會(huì)被固定在C 線與抗核酸標(biāo)記物配體結(jié)合，在質(zhì)控區(qū)（C）會(huì)出現(xiàn)一條紅色條帶，樣本中被酶切的核酸探針會(huì)被固定在 T 線與二抗結(jié)合，在檢測(cè)區(qū)（T）會(huì)出現(xiàn)一條紅色條帶。當(dāng)樣本中所有核酸探針都被酶切后，質(zhì)控區(qū)（C）將不顯色。

【預(yù)期用途】 

本產(chǎn)品用于檢測(cè)目的基因RPA、LAMP、PCR擴(kuò)增后的CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切產(chǎn)物，適用于野外現(xiàn)場(chǎng)，快速試紙條檢測(cè)。

【包裝規(guī)格/貨號(hào)】

貨號(hào)：A4631-50

包裝規(guī)格：1條/盒×50條，鋁箔袋防潮包裝。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

儲(chǔ)存條件：存放于避光干燥處，儲(chǔ)存溫度4~30℃。有效期：12個(gè)月。

【操作步驟】

1. 根據(jù)檢測(cè)樣品數(shù)量取出相應(yīng)數(shù)量的試紙條，并在試紙條上做好標(biāo)記。每根試紙條只能用于單次、單個(gè)樣品的檢測(cè)。

2. RPA、LAMP、PCR擴(kuò)增后經(jīng)CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切的擴(kuò)增產(chǎn)物，用帶濾芯的吸頭取適量擴(kuò)增產(chǎn)物到新的PCR管中，用超純水或者稀釋液(Tris-HCL 0.05M，pH8.0)稀釋5-50倍，根據(jù)實(shí)際情況選擇合適緩沖液，摸索最佳稀釋倍數(shù)，吹打混勻后進(jìn)行檢測(cè)。

3. 在PCR管中將擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋到60 uL，將試紙條結(jié)合墊端插入PCR管中，液面不高于標(biāo)示線。

4. 根據(jù)試紙條顯色情況直接讀取檢測(cè)結(jié)果，質(zhì)控線（C線）顯色后2-5min內(nèi)觀察結(jié)果，超過(guò)5分鐘判讀無(wú)效。

5. 記錄檢測(cè)結(jié)果，將試紙條密封丟棄在安全處。

【結(jié)果判讀】

1. 陽(yáng)性（+）：

試紙條質(zhì)控線（C 線）和檢測(cè)線（T 線）均出現(xiàn)紅色條帶；試紙條質(zhì)控線（C 線）不顯色，檢測(cè)線（T 線）出現(xiàn)紅色條帶。上述兩種情況均說(shuō)明 CRISPR/Cas 可進(jìn)行有效切割，并激活報(bào)告基團(tuán)顯色，結(jié)果均可判定為陽(yáng)性。

注意：當(dāng)探針濃度過(guò)低或沒(méi)有加入探針時(shí)，無(wú)論是否酶切，測(cè)試結(jié)果會(huì)顯示為陽(yáng)性，應(yīng)提高探針濃度再測(cè)試。

2. 陰性（-）：

試紙條質(zhì)控線（C 線）出現(xiàn)一條紅色條帶，檢測(cè)線（T 線）不顯色，判定為陰性結(jié)果。該結(jié)果表明 CRISPR/Cas 未能切割報(bào)告分子，未能激活報(bào)告基團(tuán)顯色。

3. 無(wú)效：

試紙條質(zhì)控線（C 線）和檢測(cè)線（T 線）均未出現(xiàn)條帶，提示所用的試紙條或擴(kuò)增試劑可能已經(jīng)損壞、失效或操作有誤。

此時(shí)，應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，重新擴(kuò)增和檢測(cè)。如果問(wèn)題仍然存在，應(yīng)立即停止使用同一批號(hào)的產(chǎn)品，并與廠家聯(lián)系。

【注意事項(xiàng)及安全提示】

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。違反或者未按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

2. 產(chǎn)品應(yīng)依照說(shuō)明書(shū)要求，儲(chǔ)存于合適的環(huán)境和溫度下，并在有效期內(nèi)使用。儲(chǔ)存不當(dāng)或產(chǎn)品過(guò)期可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。打開(kāi)包裝后請(qǐng)盡快使用試紙條，以免因試紙條受潮影響試驗(yàn)結(jié)果。檢測(cè)環(huán)境光線不足，操作者色弱等因素均可能能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

3. 使用完畢后，應(yīng)盡快將紙條裝進(jìn)密封袋，妥善處理。本產(chǎn)品為一次性使用產(chǎn)品，請(qǐng)勿重復(fù)使用。