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Super ibac P DNA桿狀病毒DNA

包裝規(guī)格：

產(chǎn)品簡介：

通過對桿狀病毒DNA的復(fù)制必需基因進行修改，使其不能在昆蟲細胞中正常復(fù)制，只有和對應(yīng)的轉(zhuǎn)移載體同源重組，修復(fù)其復(fù)制必需基因，才能在昆蟲細胞中進行復(fù)制，只有當(dāng)Super ibac DNA和攜帶目的基因的轉(zhuǎn)移載體pIAT成功同源重組后，才能在昆蟲細胞中復(fù)制存活，因此共轉(zhuǎn)染昆蟲細胞后無需任何篩選，重組率為100%，一步法轉(zhuǎn)染，簡單快速，尤其經(jīng)過基因改造后，重組蛋白更穩(wěn)定,蛋白生物活性更高。

Super ibac P DNA專門開發(fā)用于表達蛋白生產(chǎn)病毒顆粒（virus-like particle,  VLP），也適用于胞質(zhì)蛋白的表達。該系統(tǒng)細胞在極晚期才裂解，因此可延長重組蛋白細胞內(nèi)加工組裝成VLP的時間，從而提高VLP的產(chǎn)量。本試劑盒提供雙啟動子轉(zhuǎn)移載體pIAT2可同時表達多個外源蛋白。

運輸及保存條件:  

低溫運輸，-20℃保存。

產(chǎn)品規(guī)格及組分：

使用方法：

共轉(zhuǎn)染昆蟲細胞生產(chǎn)重組桿狀病毒實驗操作流程：

1.    接種細胞：將生長對數(shù)期的sf9細胞計數(shù)， 將1 x 10⁶ Sf9 細胞鋪均勻種于35mm平皿中，靜置至少1小時；

下一步操作之前觀察細胞確保細胞達到近匯合細胞單層。

2.    準備共轉(zhuǎn)染質(zhì)粒：取0.1mL無血清無抗生素細胞培養(yǎng)基到1.5mL EP管中，加入100ng super iBac DNA （5uL）和500ng 轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pIAT（5uL），輕輕混勻。加入適量轉(zhuǎn)染試劑，如5uL Lipofectin，混勻，室溫靜置20分鐘，以形成脂質(zhì)體-DNA混合物。

3.    移去培養(yǎng)皿中1mL培養(yǎng)基，若細胞培養(yǎng)基中有血清，則用1mL無血清培養(yǎng)基洗滌細胞兩遍，最后加入1mL無血清培養(yǎng)基，注意，培養(yǎng)皿中留取1mL的培養(yǎng)基。

4.    立即將混勻的0.1mL DNA+脂質(zhì)體混合液，輕輕加入到細胞培養(yǎng)皿中間，28℃培養(yǎng)箱溫育5-24小時。

5.    取出培養(yǎng)皿加入1mL新鮮細胞培養(yǎng)基（可以是10％血清培養(yǎng)基，也可根據(jù)需要加入抗生素），繼續(xù)28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)至5天。

6.    離心，收獲平皿中的培養(yǎng)液上清，放入無菌管中，作為重組病毒種子。 重組病毒種子可以長期保存于-80℃，也可短時間保存于4℃。

昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)BEVS介紹

      昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)（Baculovirus Expression Vector System－BEVS）  廣泛應(yīng)用于科研和工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域。與其他常用的重組蛋白表達系統(tǒng)相比，昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)具有外源基因表達水平高、易于表達異源多聚體蛋白、安全性等優(yōu)勢，表達的重組蛋白通常具有正確的翻譯后修飾和生物學(xué)活性，如二硫鍵的形成、磷酸化、糖基化等等。同時昆蟲細胞懸浮生長，容易放大培養(yǎng)，有利于大規(guī)模表達重組蛋白。

      Genenode君諾德公司，國內(nèi)獨家提供自產(chǎn)的第二代昆蟲桿狀病毒表達產(chǎn)品Super ibac，包括桿狀病毒DNA（Super ibac DNA），轉(zhuǎn)移載體(pIAT)，對照轉(zhuǎn)移載體(pIAT GFP)和Super ibac DNA Kit。相較于其他類似產(chǎn)品，我們價格更優(yōu)惠，供貨更迅速，同時還可以提供更快速、高效、經(jīng)濟的昆蟲桿狀病毒表達重組蛋白服務(wù)，自主研發(fā)生產(chǎn)的桿狀病毒表達試劑盒可以達到更高的重組蛋白表達水平，經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員能夠為您推薦最適合的服務(wù)，迅速解決在表達純化過程中遇到的問題。

技術(shù)原理:

Super iBac系統(tǒng)是一個全新的生產(chǎn)重組桿狀病毒的技術(shù)平臺，免去了從親代病毒中篩選重組病毒的步驟，不需要進行空斑實驗，一步法桿狀病毒蛋白表達系統(tǒng)，是目前最領(lǐng)先的桿狀病毒表達系統(tǒng)。

通過對桿狀病毒DNA的復(fù)制必需基因進行修改，使其不能在昆蟲細胞中正常復(fù)制，只有和對應(yīng)的轉(zhuǎn)移載體同源重組，修復(fù)其復(fù)制必需基因，才能在昆蟲細胞中進行復(fù)制，只有當(dāng)Super ibac DNA和攜帶目的基因的轉(zhuǎn)移載體pIAT成功同源重組后，才能在昆蟲細胞中復(fù)制存活，因此共轉(zhuǎn)染昆蟲細胞后無需任何篩選，重組率為100%，一步法轉(zhuǎn)染，簡單快速，尤其經(jīng)過基因改造后，重組蛋白更穩(wěn)定,蛋白生物活性更高，適合分泌蛋白，膜蛋白，毒性蛋白等難表達的蛋白。

第二代昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)技術(shù)特點:

1.重組蛋白表達水平高（最高可達細胞總蛋白的50%），大多數(shù)為有生物功能的可溶性蛋白；

2.真核表達系統(tǒng)，重組蛋白生物學(xué)活性高，能同時表達多個外源基因；

3.可進行翻譯后修飾:磷酸化修飾, 形成正確折疊的二硫鍵, 進行N-和O-型糖基化修飾

4.表達人源化蛋白，昆蟲細胞中糖基化途徑克服人源糖蛋白的問題。

5.大多數(shù)昆蟲細胞系在不加血清培養(yǎng)基中快速生長，得到高滴度病毒和高產(chǎn)量重組蛋白；

6.相對于其他真核表達系統(tǒng)成本較低，硬件設(shè)施成本低接近于原核表達，無需CO2培養(yǎng)箱，無需血清培養(yǎng)基；

7.規(guī)?；囵B(yǎng)簡單經(jīng)濟，適合自動化生產(chǎn)，昆蟲細胞比哺乳動物細胞操作簡單；

8.商業(yè)化的BEVS系統(tǒng)讓病毒重組及蛋白表達變得更簡單；

 不同蛋白表達系統(tǒng)的比較：

不同桿狀病毒表達系統(tǒng)介紹（BEVS）

轉(zhuǎn)染GFP基因：

桿狀病毒宿主細胞：

桿狀病毒DNA的選擇：

產(chǎn)品線（具體請詢價）：