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通用植物總RNA提取試劑盒(離心柱型)

Universal Plant Total RNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

本產(chǎn)品僅用于科研，禁止用于醫(yī)藥、臨床醫(yī)療、食品和化妝品等用途。

產(chǎn)品介紹：
通用植物總RNA提取試劑盒，適用于普通植物組織細(xì)胞的總RNA提取。采用獨(dú)特的裂解液可以迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，結(jié)合多次柱漂洗的方式，可提取沒(méi)有蛋白、細(xì)胞代謝物等雜質(zhì)污染的高純度、高質(zhì)量的總RNA。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A篩選、體外翻譯、構(gòu)建cDNA文庫(kù)等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
無(wú)污染：整套試劑盒采用RNase-Free處理。
特殊性：使用針對(duì)植物組織RNA提取的改良試劑。
易操作：操作簡(jiǎn)便，提取過(guò)程僅需 30 分鐘左右。 
吸附柱：含有特異性吸附柱。通過(guò)漂洗－離心－洗脫的步驟提取。
高質(zhì)量：有效保證RNA的完整性，回收RNA 效率高，純度高，沒(méi)有蛋白和其他雜質(zhì)污染。OD260/OD280的比值可達(dá)1.9~2.2，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)） 
樣品處理：
取 50~100 mg植物樣品在液氮中迅速研磨成粉末，加入1ml裂解液RL，渦旋劇烈震蕩混勻。

注意：由于植物多樣性非常豐富，而且同種植物的不同生長(zhǎng)發(fā)育階段和不同組織的RNA 含量都不相同，請(qǐng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況選擇合適的植物材料的用量。

提取步驟：
1.將處理后的樣品在室溫靜置5~10分鐘，使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
2.可選步驟： 12,000rpm 離心10分鐘，小心取上清轉(zhuǎn)入一個(gè)新的RNase free的離心管中。（當(dāng)樣品富含多糖或是植物的塊莖部分時(shí)可能需要此額外的分離步驟）。
3.每1ml裂解液RL加200μl氯仿。蓋緊樣品管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫靜置3分鐘。
4.在4°C12,000rpm 離心10分鐘，樣品會(huì)分成三層：下層有機(jī)相，中間層和上清水相，RNA存在于上清水相中。把上清水相轉(zhuǎn)移到新管中（不要觸碰中間層）。
5.加入上清水相0.5倍體積的無(wú)水乙醇，立即吹打混勻。
6.轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱RA中，12,000rpm 離心45秒，棄掉廢液。
7.加500μl 去蛋白液RE，12,000rpm 離心45秒，棄掉廢液。
8.加入500μl漂洗液RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000 rpm 離心45秒，棄掉廢液。
9.重復(fù)步驟7次。
10.將吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
11.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液），放入新的RNase-free離心管中，在吸附膜的中間部位加50 ~ 80μl RNase-free H2O，室溫靜置2分鐘，12,000 rpm 離心1分鐘，取得RNA后，將RNA溶液保存在－80°C，防止降解。
 

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