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通用植物RNA提取試劑盒(離心柱型,DNase I)

Universal Plant RNA Extraction Kit with DNase I(Column)

包裝規(guī)格：

本產(chǎn)品僅用于科研，禁止用于醫(yī)藥、臨床醫(yī)療、食品和化妝品等用途。

產(chǎn)品介紹：
通用植物RNA提取試劑盒(DNase I)，適用于水稻、玉米、小麥、擬南芥、番茄、煙草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物?？稍?0分鐘左右，無需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑，采用獨(dú)特的裂解液可以迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，結(jié)合DNase Ⅰ可直接在柱上消化樣品中殘留DNA。可提取沒有蛋白、細(xì)胞代謝物等雜質(zhì)污染的高純度、高質(zhì)量的總RNA。 

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A篩選、體外翻譯、構(gòu)建cDNA文庫等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
無污染：整套試劑盒采用RNase-Free處理。
特殊性：適用于提取植物組織的總RNA。
易操作：操作簡(jiǎn)便，提取過程僅需 40分鐘左右。 
安全性：無需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑。
吸附柱：含有特異性吸附柱。通過漂洗－離心－洗脫的步驟提取。
高質(zhì)量：有效保證RNA的完整性，回收RNA 效率高，純度高，沒有蛋白和其他雜質(zhì)污染。OD260/OD280的比值可達(dá)1.9~2.2，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)） 
樣品處理：
取 50~100 mg植物葉片在液氮中迅速研磨成粉末，加入1ml裂解液PRA，渦旋劇烈震蕩混勻。注意：由于植物多樣性非常豐富，而且同種植物的不同生長(zhǎng)發(fā)育階段和不同組織的RNA 含量都不相同，請(qǐng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況選擇合適的植物材料的用量。

提取步驟：
（可依照實(shí)驗(yàn)需求提前制備DNase I工作液，每一個(gè)樣品取45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I在離心管輕輕吹打混勻成工作液，可按照樣品數(shù)量按比例制備工作液。）
1.將勻漿裂解液劇烈震動(dòng)15~20秒，13,000rpm離心5~10分鐘。會(huì)有雜質(zhì)沉淀。
2.將上清液轉(zhuǎn)入新的離心管中，加0.5倍體積的無水乙醇，立即吹打混勻。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能會(huì)黏附在槍頭的外壁，注意不能將其帶入離心管中。）
3.將混合溶液（每次小于720μl）轉(zhuǎn)入套有吸附柱RA的離心管中，13,000 rpm離心2分鐘，棄掉廢液。
4.加350μl 去蛋白液RW1，室溫放置1分鐘，13,000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
5.向吸附柱RA 膜中央加入50μl 的DNase I 工作液（45μl DNase I buffer和5μl RNase-free DNase I），室溫下放置15 分鐘。
6.加入350μl去蛋白液RW1， 12,000 rpm 離心30秒 ，棄廢液。
7.加入500μl漂洗液RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），13,000 rpm 離心30秒，棄掉廢液。
8.重復(fù)步驟7一次。
9.將吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
10.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液），放入新的RNase-free離心管中，在吸附膜的中間部位加30 ~ 50μl  RNase-free H2O室溫靜置1分鐘，12,000 rpm 離心1分鐘。取得RNA后，將RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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