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多糖多酚復(fù)雜植物RNA提取試劑盒(離心柱型)

Complex Plant RNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

本產(chǎn)品僅用于科研，禁止用于醫(yī)藥、臨床醫(yī)療、食品和化妝品等用途。

產(chǎn)品介紹：
多糖多酚復(fù)雜植物RNA提取試劑盒，適用于復(fù)雜中草藥如石斛、丹參、雪蓮、人參等；復(fù)雜淀粉種子如水稻、小麥、玉米種子等；復(fù)雜果實(shí)如葡萄、藍(lán)莓、草莓、西瓜果實(shí)等；復(fù)雜抗逆植物如冬青、松針、沙棘、胡楊等；復(fù)雜花卉如月季、玫瑰、梅、牡丹花等；復(fù)雜多糖植物如紫菜、仙人掌、蘆薈等植物的RNA提取?？稍?5分鐘左右，無(wú)需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑，采用獨(dú)特的裂解液可以迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，結(jié)合高效的gDNA過(guò)濾技術(shù)，可高效去除基因組DNA，純化得到的RNA幾乎不含DNA污染。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A篩選、體外翻譯、構(gòu)建cDNA文庫(kù)等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
無(wú)污染：整套試劑盒采用RNase-Free處理。
特殊性：適用于提取多糖多酚，復(fù)雜植物組織的總RNA。
易操作：操作簡(jiǎn)便，提取過(guò)程僅需 25分鐘左右。 
安全性：無(wú)需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑。
吸附柱：含有特異性吸附柱。通過(guò)漂洗－離心－洗脫的步驟提取。
高質(zhì)量：有效保證RNA的完整性，回收RNA 效率高，純度高，沒(méi)有蛋白和其他雜質(zhì)污染。OD260/OD280的比值可達(dá)1.9~2.2，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)） 
樣品處理：
取 50~100 mg植物葉片在液氮中迅速研磨成粉末，加入1ml裂解液PLB（已添加β-巰基乙醇），渦旋劇烈震蕩混勻。注意：由于植物多樣性非常豐富，而且同種植物的不同生長(zhǎng)發(fā)育階段和不同組織的RNA 含量都不相同，請(qǐng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況選擇合適的植物材料的用量。（依據(jù)樣品需求，可將β-巰基乙醇至終濃度提高至10~20%。如果是特別復(fù)雜植物樣品，可嘗試在裂解液中加入PVP40至終濃度2%。）

提取步驟：
1.65°C水浴5~10分鐘，中間偶爾顛倒1~2次幫助裂解。
2.將裂解物13,000 rpm離心10分鐘，會(huì)有雜質(zhì)沉淀。
3.將上清液轉(zhuǎn)入新的離心管中，加入0.5倍上清體積的無(wú)水乙醇，立即吹打混勻。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能會(huì)黏附在槍頭的外壁，注意不能將其帶入離心管中。）
4.將混合溶液（每次小于750μl，可分兩次加入）轉(zhuǎn)入套有基因組清除柱的離心管中，13,000 rpm離心1分鐘，棄掉廢液。
5.將基因組DNA清除柱放入新的2ml離心管內(nèi)，加入500μl裂解液RPS，13,000 rpm離心30秒， 收集濾液（RNA在濾液中），加入0.5倍濾液體積的無(wú)水乙醇，立即吹打混勻。
6.將混合溶液（每次小于750μl，可分兩次加入）轉(zhuǎn)入套有吸附柱RA的離心管中，13,000 rpm離心1分鐘，棄掉廢液。
7.加700μl Buffer RW1，室溫放置1分鐘，13,000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
8.加入700μl Buffer RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），13,000 rpm 離心30秒，棄掉廢液。
9.再次加入500μl Buffer RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），13,000 rpm離心3分鐘，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。 
10.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液），放入新的RNase-free離心管中，在吸附膜的中間部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室溫靜置1分鐘，12,000 rpm 離心1分鐘。取得RNA后，將RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

取50mg樣品柑橘內(nèi)皮組織提取RNA

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