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DNase I柱上消化試劑盒(Rnase free,RNA提取過程中清除gDNA殘留)

DNA Erasion Kit with DNase I(Column)

包裝規(guī)格：

一.產(chǎn)品儲存：
   DNase Buffer -20 ℃保存， 去蛋白液RW1常溫或者4 ℃保存，RNase free DNase－20 ℃保存，避免反復(fù)凍融。

二.產(chǎn)品介紹：
   任何總RNA提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA的微量殘留，本公司的SpinFast系列RNA提取產(chǎn)品，由于采取了本公司獨(dú)特的緩沖體系和特殊硅膠吸附膜，可以去除絕大多數(shù)的DNA污染，所以一般不用進(jìn)行DNase I 消化。但是對于一些敏感的下游實(shí)驗(yàn)，需要去除微量的DNA殘留，可以購買本公司DNase I柱上消化試劑盒（RNase free），直接在離心吸附柱上面消化殘留的DNA，然后純凈RNA可以洗脫下來直接使用。本產(chǎn)品兼容所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒。

三.產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.簡單快速，條件經(jīng)過優(yōu)化，一般15分鐘可以消化清除硅膠膜上殘留DNA。
2.確保RNase free， 可以保證RNA分子完整性。
3.兼容性廣，可整合進(jìn)所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒柱上消化，不需要提取到總RNA后再單獨(dú)去除里面的殘留DNA。
  

注意事項(xiàng)：
      DNase是非常敏感，易物理損壞變性喪失活性，所以不要漩渦混勻DNase I和工作液。輕輕吹打或者上下顛倒混勻混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鮮的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套專門用于柱上消化，一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化，不能替代。

四.操作步驟：
1.按照正常RNA提取步驟操作，裂解混合物過柱離心完全后（RNA包括殘留DNA吸附到離心柱硅膠膜上），加入去蛋白液RW1步驟前按照以下步驟操作。

2.取一個新的1.5ml離心管，加入45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I，輕輕吹打混勻成DNase I工作液（處理多個離心柱子要按照比例放大制備工作液）。置冰上備用。

注：如果殘留DNA過多導(dǎo)致消化不完全，可按比例加大使用酶量來提高消化效果（如90μl DNase I buffer和10μl RNase free DNase I）。

3.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1，12,000 rpm 離心30 秒，棄廢液，將吸附柱放回收集管中。

4.向吸附柱RA 中央加入50μl 的DNase I 工作液，室溫（20-30℃）放置15 分鐘。注意直接將工作液滴在膜中央上，不要讓工作液滴在O型圈或是離心柱管壁上。

5.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1， 12,000 rpm 離心30-60 秒，棄廢液，將吸附柱放回收集管中。

6.接漂洗液RW步驟等后續(xù)步驟。如果是其它公司試劑盒，則接最后的一個漂洗液漂洗等后續(xù)步驟。

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